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色譜柱按照日常用途可分為分析型和制備型兩類
色譜柱按照日常用途可分為分析型和制備型兩類
更新時(shí)間:2022-10-20 點(diǎn)擊次數(shù):946
色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對(duì)色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機(jī)聚合物微球、多孔碳等,其粒度一般為3、5、7、10μm等,柱效理論值可達(dá)5~16萬/米。對(duì)于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效;對(duì)于同系物分析,只要500即可;對(duì)于較難分離物質(zhì)對(duì)則可采用高達(dá)2萬的柱子,因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要。
分離原理:
采用反相流動(dòng)相體系,而按照正相順序出峰。通過親水性相互作用,可有效的分離反相色譜柱中因保留能力弱而難分離的強(qiáng)極性化合物。是一種分離機(jī)理,而具備這種分離機(jī)理的鍵合相種類非常多。在HILIC中,固定相是極性的,流動(dòng)相中的水相部分表現(xiàn)為強(qiáng)洗脫溶劑,這與傳統(tǒng)的反相色譜法*相反。
色譜柱
按用途可分為分析型和制備型兩類,尺寸規(guī)格也不同:
1、常規(guī)分析柱(常量柱),內(nèi)徑2~5mm(常用4.6mm,國內(nèi)有4mm和5mm),柱長10~30cm;
2、窄徑柱(narrow bore,又稱細(xì)管徑柱、半微柱semi-microcolumn),內(nèi)徑1~2mm,柱長10~20cm;
3、毛細(xì)管柱(又稱微柱microcolumn),內(nèi)徑0.2~0.5mm;
4、半制備柱,內(nèi)徑>5mm;
5、實(shí)驗(yàn)室制備柱,內(nèi)徑20~40mm,柱長10~30cm;
6、生產(chǎn)制備柱內(nèi)徑可達(dá)幾十厘米。柱內(nèi)徑一般是根據(jù)柱長、填料粒徑和折合流速來確定,目的是為了避免管壁效應(yīng)。
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